電泳遷移率變動(dòng)分析(EMSA)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

使用說(shuō)明書(shū)

僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

第1版（2016年04月修訂）

關(guān)聯(lián)信息

凝膠遷移實(shí)驗(yàn)又稱(chēng)凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)（EMSA，electrophoretic mobility shift assay），是目前研究核酸與蛋白質(zhì)相互作用的一種重要實(shí)驗(yàn)手段，常用于轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子相互作用的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)利用核酸與蛋白結(jié)合后，在非變性聚丙烯酰氨凝膠中電泳的遷移速率會(huì)明顯降低的原理，通過(guò)設(shè)計(jì)特異性和非特異性的探針，通過(guò)孵育與目標(biāo)蛋白結(jié)合，形成探針-蛋白復(fù)合體，由于分子量變大，在聚丙烯酰氨凝膠中的電泳遷移速率下降，相比于未結(jié)合的探針會(huì)出現(xiàn)滯后效應(yīng)，再通過(guò)探針上特殊的標(biāo)記物性質(zhì)，通過(guò)轉(zhuǎn)膜、顯色或曝光，探針-蛋白復(fù)合體所在的位置便能形成條帶，從而證明核酸與蛋白的相互作用。目前隨著實(shí)驗(yàn)技術(shù)的改進(jìn)，能夠定性和定量的完成實(shí)驗(yàn)。

EMSA的實(shí)驗(yàn)流程和周期

實(shí)驗(yàn)流程	周期	特點(diǎn)
1、樣品的制備	議定	1、可提供原核表達(dá)、酵母表達(dá)、病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)以及哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)等多種重組蛋白表達(dá)方式； 2、可提供天然樣本目的蛋白富集和純化服務(wù)； 3、可提供專(zhuān)用于胞漿和核蛋白的細(xì)胞裂解液，作用條件溫和，裂解效率高，蛋白損傷小。
2、探針的合成和制備	1-2周	1、可提供人工合成探針； 2、探針標(biāo)記：可提供DIG、Biotin、Cy5等多種非同位素標(biāo)記； 3、可提供Super-Shift EMSA、雙熒光EMSA等多種基于EMSA技術(shù)的實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
3、探針與樣品孵育
4、6.5%非變性聚丙烯酰胺凝膠制備以及電泳
5、轉(zhuǎn)膜
6、檢測(cè)

備注：
  1、所有的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目需遵守相關(guān)法律條款；
2、所有樣本都必須不具有傳染性；
3、客戶(hù)可以根據(jù)自己的要求，定制個(gè)性化的實(shí)驗(yàn)方案。