腺病毒包裝實驗服務
使用說明書
僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
第1版(2016年04月修訂)
[關(guān)聯(lián)信息]
??借助于病毒顆粒作為基因的載體,利用病毒的侵染特性,自發(fā)的侵染哺乳動物細胞,將目的基因?qū)氩溉閯游锛毎?,從而達到目的產(chǎn)物的超量表達或干涉。腺病毒表達系統(tǒng)采用的是人工改造過后的Ad5病毒系統(tǒng),通常包括1個表達質(zhì)粒和1到多個輔助質(zhì)粒,采用293細胞作為宿主繁育病毒,通過離心.超濾等過程制備和富集重組腺病毒顆粒,完成腺病毒的包裝過程。包裝好的重組病毒侵染細胞,目的基因游離于宿主細胞基因組外進行獨立表達,可實現(xiàn)目的蛋白快速、高豐度的表達,同時避免因為基因整合而產(chǎn)生的基因突變現(xiàn)象。??
[服務項目內(nèi)容]
????
??項目內(nèi)容?? | ??實驗流程?? | ??周期?? |
??實驗方案確定?? | ??1. 客戶信息分析?? ??2. 實驗方案確定?? | ??1周?? |
??目的基因獲取??? | ??1. PCR獲取目的基因片段?? ??2. 基因化學合成?? | ??2-4周?? |
??載體構(gòu)建?? | ??1. 載體構(gòu)建?? ??2. 質(zhì)粒提取和去內(nèi)毒素處理?? | ??2-3周?? |
??共轉(zhuǎn)???染 | ??1. 表達質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染293細胞?? ??2. 細胞培養(yǎng)?? | ??1周?? |
??重組病毒收集?? | ??1. 重組病毒收集、濃縮、分裝和保存?? ??2. 重組病毒滴度檢測?? | ??1周?? |
[客戶提供信息]
??1. 目的基因及其相關(guān)片段的DNA序列的詳細信息;
??2. 客戶的具體要求。????
[反饋客戶內(nèi)容]
??1. 實驗方案;
??2. 基因克隆陽性質(zhì)粒;??
??3. 滴度范圍在1*1011~1*1013TU/ml之間的重組病毒儲液。