細(xì)胞增殖和毒性檢測(cè)服務(wù)
使用說(shuō)明書(shū)
僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
第1版(2016年04月修訂)
方法 | 原理 | 適用范圍 | 優(yōu)點(diǎn) | 缺點(diǎn) |
MTT | 活細(xì)胞線(xiàn)粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜能溶解細(xì)胞中的甲瓚,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。 | 廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、細(xì)胞增殖測(cè)定、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等 | 靈敏度高、價(jià)格經(jīng)濟(jì)實(shí)惠 | MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物不溶于水,需被溶解后才能檢測(cè)。這不僅使檢測(cè)時(shí)的工作量增加,也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響,而且溶解甲瓚的有機(jī)溶劑有毒性。 |
CCK-8 | WST-8是一種類(lèi)似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線(xiàn)粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線(xiàn)性關(guān)系。用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。 | 廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞增殖試驗(yàn)、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及藥敏試驗(yàn)等 | 1、使用方便,省去了洗滌細(xì)胞,不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑; 2、能快速檢測(cè); 3、靈敏度很高,甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度; 4、重復(fù)性?xún)?yōu)于MTT法; 5、對(duì)細(xì)胞毒性小; 6、檢測(cè)試劑中為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開(kāi)即用。 | 1、價(jià)格比較貴。 2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話(huà)容易產(chǎn)生漏加或多加。 |
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