實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
第1版(2016年04月修訂)
關(guān)聯(lián)信息
實(shí)時(shí)熒光定量PCR的原理是通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過程,結(jié)合相應(yīng)的軟件對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析,計(jì)算待測樣品模板的初始濃度。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR以其得到結(jié)果快、靈敏度高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)研究中,如基因表達(dá)分析、MicroRNA 與非編碼 RNA 分析、SNP 基因分型分析、拷貝數(shù)變異 (CNV)分析等。
實(shí)驗(yàn)流程
1.提取RNA
2.cDNA合成
3.引物設(shè)計(jì)
4.PCR預(yù)試驗(yàn)
5.定量PCR
6.結(jié)果分析
實(shí)驗(yàn)儀器
Roche羅氏LightCycler? 480實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)
服務(wù)內(nèi)容
1.客戶提供基因定量PCR引物或引物序列;
2.客戶提供cDNA或DNA;
3.預(yù)實(shí)驗(yàn),PCR檢測引物的特異性和擴(kuò)增效率;
4.正式實(shí)驗(yàn),實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測;
5.ΔΔCT法分析并處理結(jié)果,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
實(shí)驗(yàn)類型和周期
項(xiàng)目 | 樣品數(shù) | 周期 |
SYBR Green I染料法 | 檢測樣品數(shù)<10 | 2~3個(gè)工作日 |
10≤檢測樣品數(shù)≤20 | 3~5個(gè)工作日 | |
檢測樣品數(shù)>20 | 4~7個(gè)工作日 | |
探針法 | 檢測樣品數(shù)<10 | 1~3周 |
10≤檢測樣品數(shù)≤20 | ||
檢測樣品數(shù)>20 |
備注:
1.所有的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目需遵守相關(guān)法律條款;
2.所有樣本都必須不具有傳染性。