鏈霉親和素瓊脂糖微球
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僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
第1版(2016年04月修訂)
[產(chǎn)品信息]
鏈霉親和素是阿維丁鏈霉菌(streptomyces avidinii)分泌的蛋白,以同源四聚體的形式存在,每摩爾可高度特異性結(jié)合4摩爾生物素分子,其非特異性結(jié)合率遠(yuǎn)低于親和素,廣泛應(yīng)用于各種生化和免疫檢測的信號(hào)放大系統(tǒng)中。瓊脂糖微球共價(jià)結(jié)合的鏈霉親和素是一種固定化重組鏈霉素親和素蛋白的微珠狀樹脂,可用于生物素化蛋白、抗體、核酸等分子的捕獲、純化和免疫沉淀等操作。
[性能參數(shù)]
基質(zhì) | 高度交聯(lián)4 % 瓊脂糖 |
粒徑范圍 | 45-165 μM |
平均粒徑 | 90 μM |
結(jié)合載量 | 1 mg(生物素化抗體)/mL(微球) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 所有常用緩沖溶液中穩(wěn)定 |
保存溶液 | 0.01M PBS (pH7.4),0.05 % proclin300 |
保存溫度 | 4 ℃ |
[適用范圍]
此產(chǎn)品可用于多種生物素化的生物分子的捕獲、純化和免疫沉淀等實(shí)驗(yàn)。
[實(shí)驗(yàn)步驟]
下面給出的方法是純化生物素化蛋白的一般步驟。根據(jù)蛋白質(zhì)的類型,可能需要對(duì)方案進(jìn)行特定的修改。
緩沖液:
結(jié)合緩沖液:0.01M PBS,pH 7.2-7.4。
洗脫緩沖液:100 mM glycine,pH 2.2-2.8。
1. 進(jìn)行鏈霉親和素瓊脂糖微球樹脂的裝填(適用于各種中壓色譜層析柱的填裝)。
2. 將制備好的層析柱連接到色譜系統(tǒng)中。用5倍柱體積的結(jié)合緩沖液平衡樹脂。
3. 將生物素化蛋白樣品加入層析柱中,保證樣品與樹脂充分接觸,室溫孵育1-2h。
4. 用至少10倍柱體積的結(jié)合緩沖液清洗樹脂,去除非特異性吸附的雜蛋白。
5. 用5-10倍柱體積的洗脫緩沖液洗脫結(jié)合的生物素化樣品。
6. 根據(jù)下游應(yīng)用,采用合適的緩沖液進(jìn)行透析,保存純化后的樣本。
7. 將鏈霉親和素瓊脂糖微球樹脂進(jìn)行清洗和保存。
[驗(yàn)證數(shù)據(jù)]
經(jīng)鏈霉親和素瓊脂糖微球純化后的生物化分子的SDS-PAGE檢測結(jié)果:
Figure. SDS-PAGE
[儲(chǔ)存及有效期]
未開封4℃保存,有效期12個(gè)月;開封后4℃保存1-2周,盡快使用。如需多次使用,請(qǐng)?jiān)诒4鏁r(shí)添加0.03% proclin300。
[注意事項(xiàng)]
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。