SDS-PAGE凝膠快速配制試劑盒

使用說明書

僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

第1版（2016年04月修訂）

[產(chǎn)品信息]

SDS-PAGE凝膠快速配制試劑盒提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑。配制方法簡(jiǎn)單且快速，方便客戶開展SDS-PAGE實(shí)驗(yàn)。

[試劑組分]

名稱	規(guī)格
SDS-PAGE下層膠預(yù)混液（濃度可選）	7.5 mL * 2
Tris8.8下層膠緩沖液	5 mL
5%SDS-PAGE上層膠預(yù)混液	8.7 mL
Tris6.8上層膠緩沖液	1.25 mL
10%過硫酸銨	0.3mL
產(chǎn)品說明書	1份

[下層膠濃度備選]

下層膠（分離膠）可按下表選用SDS-PAGE下層膠預(yù)混液，共5種常見濃度，包括6%、8%、10%、12%和15%。請(qǐng)根據(jù)目的蛋白的分子量確定SDS-PAGE下層膠預(yù)混液濃度。

編號(hào)	SDS-PAGE下層膠預(yù)混液	目的蛋白最佳分離范圍
IS149-1	6% SDS-PAGE下層膠預(yù)混液	70-250kD
IS149-2	8% SDS-PAGE下層膠預(yù)混液	40-150kD
IS149-3	10% SDS-PAGE下層膠預(yù)混液	25-100kD
IS149-4	12% SDS-PAGE下層膠預(yù)混液	18-60kD
IS149-5	15% SDS-PAGE下層膠預(yù)混液	10-40kD

[儲(chǔ)存及有效期]

試劑盒拆開保存，10%過硫酸銨溶液分裝成小管-20℃避光保存，SDS-PAGE下層膠預(yù)混液和SDS-PAGE上層膠預(yù)混液4℃避光保存，其它試劑4℃保存。試劑盒質(zhì)保期6個(gè)月。

 

[操作步驟]

1、以伯樂、六一的小型電泳槽為例；安裝灌膠模具，依照模具說明書進(jìn)行。

2、使用前將試劑盒中試劑緩慢均衡至室溫（18-25℃），以加快凝膠凝聚速度。

3、按照下層膠(分離膠)體積配比參考表，選擇配方配制所需體積的膠溶液。例如1mm厚的模具配制5mL分離膠溶

液，將膠溶液混勻之后加入模具中，然后在分離膠的上表面加2-4mm高的異丙醇或者純水以封住膠面，保持膠面平整。

下層膠(分離膠)體積配比參考表

成分	5mL	10mL	15mL	20mL	30mL	50mL
**SDS-PAGE下層膠預(yù)混液	3.75mL	7.5mL	11.25mL	15mL	22.5mL	37.5mL
Tris 8.8下層膠緩沖液	1.25mL	2.5mL	3.75mL	5mL	7.5mL	12.5mL
10%過硫酸銨	0.05mL	0.1mL	0.15mL	0.2mL	0.3mL	0.5mL

4、室溫放置20-40分鐘后，可以看到一個(gè)分離界面，傾倒掉上層異丙醇或純水。

5、按照上層膠(濃縮膠)體積配比參考表，配制2mL或3mL濃縮膠溶液，混勻之后加入模具，并插入與模具大小相同，與凝膠厚度相當(dāng)?shù)氖嶙?，室溫放?0-40分鐘使凝膠凝聚。

上層膠(濃縮膠)體積配比參考表

成分	2mL	3mL	4mL	5mL
5% SDS-PAGE上層膠預(yù)混液	1.75mL	2.6mL	3.5mL	4.35mL
Tris 6.8上層膠緩沖液	0.25mL	0.38mL	0.5mL	0.63mL
10%過硫酸銨	0.02mL	0.03mL	0.04mL	0.05mL

6、配制好的凝膠，如果當(dāng)天暫不使用，可以保鮮膜封好，在4℃保存1-2天內(nèi)使用。

 

[注意事項(xiàng)]

1、預(yù)混液中含有Acr-Bis，對(duì)人體有毒，且預(yù)混液中含有易燃易揮發(fā)且有腐蝕性的成分，操作時(shí)請(qǐng)?zhí)貏e小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

2、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套、口罩操作。

3、說明書中推薦的凝膠凝聚時(shí)間受溫度影響，室溫25℃時(shí)，凝膠凝聚時(shí)間為20-40分鐘。當(dāng)室溫低于20℃，建議放入恒溫箱（37℃）。

4、請(qǐng)稍微傾斜插入梳子，以減少或避免氣泡進(jìn)入。

5、本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。