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P物質(zhì)(SP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

ELISA Kit for Substance P (SP)

  • P物質(zhì)(SP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • P物質(zhì)(SP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • P物質(zhì)(SP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 實驗結(jié)果圖
  • CEA393Mu.jpg 標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
  • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證

特異性

本試劑盒用于檢測P物質(zhì)(SP)，經(jīng)檢測與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應(yīng)。
由于受到技術(shù)及樣本來源的限制，不可能完成對所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測，因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的P物質(zhì)(SP)（加標(biāo)樣品），重復(fù)測定并計算其均值，回收率為測定值與理論值的比率。

樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 93-101 97
EDTA plasma(n=5) 90-104 97
heparin plasma(n=5) 98-105 102

精密度

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差：選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差： CV<10%
批間差： CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的P物質(zhì)(SP)，并倍比稀釋成1:2，1:4，1:8，1:16的待測樣本，線性范圍即為稀釋后樣本中P物質(zhì)(SP)含量的測定值與理論值的比率。

樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 92-105% 80-92% 92-104% 80-105%
EDTA plasma(n=5) 84-101% 79-95% 99-105% 90-98%
heparin plasma(n=5) 84-103% 88-102% 78-104% 84-95%

穩(wěn)定性

經(jīng)測定，試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

實驗流程

1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）50µL，
    加入50µL檢測液A(臨用前配制);
    37°C溫育1小時。
3. 洗板3次；
4. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
5. 洗板5次；
6. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
7. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。

實驗原理

本試劑盒應(yīng)用競爭抑制酶聯(lián)免疫分析法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。將P物質(zhì)(SP)單克隆抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗體的微孔中同時加入生物素標(biāo)記的抗原和待測抗原(標(biāo)準(zhǔn)品或樣本)，待測抗原與生物素標(biāo)記抗原對特異性抗體進行競爭結(jié)合。溫育后經(jīng)洗滌去掉未結(jié)合物，然后加入HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過溫育和徹底洗滌后加入底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。待測標(biāo)本濃度越高，標(biāo)記抗原和抗體的結(jié)合就越受到抑制，顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關(guān)，而與樣品中待測物質(zhì)含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度。

相關(guān)產(chǎn)品

編號 適用物種：Mus musculus (Mouse，小鼠) 應(yīng)用(僅供研究使用，不用于臨床診斷！)
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參考文獻

雜志 參考文獻
Journal of Veterinary Internal Medicine A Potential Role for Substance P and Interleukin-6 in the Cerebrospinal Fluid of Cavalier King Charles Spaniels with Neuropathic Pain [Pubmed: 23659719]
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