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高溫需求因子A1(HTRA1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)

CLIA Kit for High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)

HtrA; L56; ORF480; PRSS11; HtrA Serine Peptidase 1; Protease,Serine,11; IGFBP5-Protease; High-temperature requirement A serine peptidase 1

  • 高溫需求因子A1(HTRA1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) 產品包裝(模擬)
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  • 高溫需求因子A1(HTRA1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) 實驗結果圖
  • SCL604Hu.jpg 標準曲線圖
  • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證

特異性

本試劑盒用于檢測高溫需求因子A1(HTRA1),經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的高溫需求因子A1(HTRA1)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。

樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 82-103 90
EDTA plasma(n=5) 78-101 96
heparin plasma(n=5) 98-105 101

精密度

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差: CV<10%
批間差: CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內加入適量的高溫需求因子A1(HTRA1),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中高溫需求因子A1(HTRA1)含量的測定值與理論值的比率。

樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 78-95% 96-104% 90-98% 85-103%
EDTA plasma(n=5) 98-105% 79-101% 82-94% 78-102%
heparin plasma(n=5) 83-91% 92-99% 82-91% 83-97%

穩(wěn)定性

經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

實驗流程

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加底物100µL,37°C孵育10分鐘;
8. 讀數(shù)。

實驗原理

將高溫需求因子A1(HTRA1)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的高溫需求因子A1(HTRA1)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的高溫需求因子A1(HTRA1)抗體,將未結合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次徹底洗滌后加入底物。加入底物后會產生輝光型光信號。發(fā)射光強度和樣品中的高溫需求因子A1(HTRA1)呈正相關。用化學發(fā)光儀測定相對光單位(RLU),計算樣品濃度。

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參考文獻

雜志 參考文獻
Placenta Alterations of maternal plasma HTRA1 level in preeclampsia complicated by IUGR [PubMed: 23083999]
Placenta Upregulation of HtrA4 in the placentas of patients with severe pre-eclampsia [PubMed: 22964307]
Exp Gerontol Association of frailty with the serine protease HtrA1 in older adults [Pubmed:27058767]
International Journal of?Clinical?and Experimental Pathology HtrA1 up-regulates expression of MMPs via Erk1/2/Rock-dependent pathways [files:ijcep0069706.pdf]
Pregnancy Hypertension Association between first trimester plasma htra1 level and subsequent preeclampsia: a possible early marker? []
American journal of translational research HtrA1 upregulates the expression of ADAMTS-5 in HNPCs via the ERK/NF-κB/JNK signaling pathway [Pubmed: 31497227]
J Matern Fetal Neonatal Med First trimester HtrA1 maternal plasma level and spontaneous preterm birth [Pubmed: 32102578]
BMC Geriatr Cross-sectional associations among P3NP, HtrA, Hsp70, Apelin and sarcopenia in Taiwanese population [33743591]
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