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血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 5 (ADAMTS5)

ADMP-2; Aggrecanase-2

  • 血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • 血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • 血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 實驗結(jié)果圖
  • SEK205Mu.jpg 標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
  • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證

特異性

本試劑盒用于檢測血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)，經(jīng)檢測與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應(yīng)。
由于受到技術(shù)及樣本來源的限制，不可能完成對所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測，因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)（加標(biāo)樣品），重復(fù)測定并計算其均值，回收率為測定值與理論值的比率。

樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 78-90 85
EDTA plasma(n=5) 95-102 99
heparin plasma(n=5) 79-91 86

精密度

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差：選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差： CV<10%
批間差： CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)，并倍比稀釋成1:2，1:4，1:8，1:16的待測樣本，線性范圍即為稀釋后樣本中血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)含量的測定值與理論值的比率。

樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 81-101% 89-96% 83-104% 79-95%
EDTA plasma(n=5) 80-97% 92-105% 78-99% 95-105%
heparin plasma(n=5) 85-93% 86-99% 88-105% 83-96%

穩(wěn)定性

經(jīng)測定，試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。

實驗流程

1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。

實驗原理

將血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入生物素化的血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)抗體，將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記的親和素，再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值)，計算樣品濃度。

相關(guān)產(chǎn)品

編號 適用物種：Mus musculus (Mouse，小鼠) 應(yīng)用(僅供研究使用，不用于臨床診斷！)
SEK205Mu 血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) Enzyme-linked immunosorbent assay for Antigen Detection.
LMK205Mu 血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)等多因子檢測試劑盒(流式熒光發(fā)光法) FLIA Kit for Antigen Detection.

參考文獻(xiàn)

雜志 參考文獻(xiàn)
PLoS ONE A Combinatorial Relative Mass Value Evaluation of Endogenous Bioactive Proteins in Three-Dimensional Cultured Nucleus Pulposus Cells of Herniated Intervertebral Discs: Identification of Potential Target Proteins for Gene Therapeutic Approaches [Plosone: Source]
Osteoarthritis and Cartilage Lack of anti-inflammatory and anti-catabolic effects on basal inflamed osteoarthritic chondrocytes or synoviocytes by adipose stem cell-conditioned medium [PubMed: 26521751]
Journal of Cellular and Molecular Medicine VIP and CRF reduce ADAMTS expression and function in osteoarthritis synovial fibroblasts [Pubmed:26818776]
Int Wound J. From varices to venous ulceration: the story of chronic venous disease described by metalloproteinases. [Pubmed:26991748]
The American journal of pathology Healthy and Osteoarthritic Synovial Fibroblasts Produce a Disintegrin and Metalloproteinase with Thrombospondin Motifs 4, 5, 7, and 12: Induction by IL-1β and Fibronectin and Contribution to Cartilage Damage. [pubmed:27449198]
PLoS One. Self-complementary adeno-associated virus serotype 6 mediated knockdown of ADAMTS4 induces long-term and effective enhancement of aggrecan in degenerative human nucleus pulposus cells: A new therapeutic approach for intervertebral disc disorders. [pubmed:28207788]
PLoS One Self-complementary adeno-associated virus serotype 6 mediated knockdown of ADAMTS4 induces long-term and effective enhancement of aggrecan in degenerative human nucleus pulposus cells: A new therapeutic approach for intervertebral disc disorders [10.1371:journal.pone.0172181]
International Wound Journal From varices to venous ulceration: the story of chronic venous disease described by metalloproteinases [pubmed:26991748]
BMC musculoskeletal disorders Hemoglobin stimulates the expression of ADAMTS-5 and ADAMTS-9 by synovial cells: a possible cause of articular cartilage damage after intra-articular hemorrhage. [pubmed:29137610]
Journal of Clinical Medicine The Effects of TNF-α Inhibition on the Metabolism of Cartilage: Relationship between KS, HA, HAPLN1 and ADAMTS4, ADAMTS5, TOS and TGF-β1 Plasma?… [Pubmed:35407621]
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