抗甘露糖結合蛋白抗體(Anti-MBL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
ELISA Kit for Anti-Mannose Binding Lectin Antibody (Anti-MBL)
MBL2; COLEC1; HSMBPC; MBP1; MBP; Collectin-1; Mannose-binding protein C; Mannan Binding Protein; Mannose-Binding Lectin(Protein C)2,Soluble(Opsonic Defect)
- 編號AEB480Hu
- 物種Homo sapiens (Human,人) 相同的名稱,不同的物種。
- 實驗方法間接法
- 反應時長2h, 30min
- 檢測范圍6.25-400ng/mL
- 靈敏度最小可檢測劑量小于等于2.45ng/mL.
- 樣本類型Serum, plasma and other biological fluids
- 下載 英文說明書 中文說明書
- 規(guī)格 48T96T 96T*5 96T*10 96T*100
- 價格 ¥ 4192 ¥ 5988 ¥ 26946 ¥ 50898 ¥ 419160
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特異性
本試劑盒用于檢測抗甘露糖結合蛋白抗體(Anti-MBL),經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。
回收率
分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的抗甘露糖結合蛋白抗體(Anti-MBL)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。
樣本 | 回收率范圍(%) | 平均回收率(%) |
serum(n=5) | 95-104 | 101 |
EDTA plasma(n=5) | 79-104 | 99 |
heparin plasma(n=5) | 81-105 | 92 |
精密度
精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差: CV<10%
批間差: CV<12%
線性
在定值血清及血漿樣本內加入適量的抗甘露糖結合蛋白抗體(Anti-MBL),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中抗甘露糖結合蛋白抗體(Anti-MBL)含量的測定值與理論值的比率。
樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
serum(n=5) | 83-97% | 97-105% | 93-101% | 93-101% |
EDTA plasma(n=5) | 86-93% | 93-103% | 83-104% | 95-103% |
heparin plasma(n=5) | 95-103% | 80-103% | 79-98% | 80-101% |
穩(wěn)定性
經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
實驗流程
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板5次;
5. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
6. 加終止液50µL,立即450nm讀數。
實驗原理
將抗原包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的抗甘露糖結合蛋白抗體(Anti-MBL)與連接于固相載體上的抗原結合,然后加入HRP標記的二抗,徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗甘露糖結合蛋白抗體(Anti-MBL)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
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參考文獻
雜志 | 參考文獻 |
American Journal of Nephrology | Analysis of the Urine Proteome of Human Contrast-Induced Kidney Injury Using Two-Dimensional Fluorescence Differential Gel Electrophoresis/Matrix-Assisted Laser Desorption Time-of-Flight Mass Spectrometry/Liquid Chromatography Mass Spectrometry. [Karger: 000255439] |
Current Eye Research | Serum Levels and H/L Gene Polymorphism of Mannose-Binding Lectin in Primary Open Angle Glaucoma [Ingenta: art00007] |
Journal of Clinical Immunology | Complement activation contributes to the injury and outcome of kidney in human anti-glomerular basement membrane disease. [PubMed: 22941511] |
Clinical and Experimental Immunology | Urinary mannose-binding lectin is a biomarker for predicting the progression of immunoglobulin (Ig)A nephropathy [PubMed: PMC3406374] |
Clin J Am Soc Nephrol. | Alternative Complement Pathway Activation Products in Urine and Kidneys of Patients with ANCA-Associated GN [Pubmed: 24115193] |
ACTA TROPICA | Novel findings on the role of ficolins and colectins in the innate response against Leishmania braziliensis [Pubmed: 32827456] |
PLoS One | Complement activation profile of patients with primary focal segmental glomerulosclerosis [Pubmed: 32569286] |
LIFE SCIENCES | The lectin pathway of complement and the initial recognition of Leishmania infantum promastigotes [34242658] |