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M2-型丙酮酸激酶(PKM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

ELISA Kit for Pyruvate kinase isozymes M2 (PKM2)

M2PK; PKM; M2-PK; PKM1; CTHBP; OIP3; PK3; PKM; TCB; THBP1; Pyruvate kinase muscle isozyme; Thyroid hormone-binding protein 1; Cytosolic thyroid hormone-binding protein; Pyruvate Kinase, Muscle

  • M2-型丙酮酸激酶(PKM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • M2-型丙酮酸激酶(PKM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • M2-型丙酮酸激酶(PKM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖
  • SEA588Ra.jpg 標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
  • Certificate 通過(guò)ISO 9001、ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證

特異性

本試劑盒用于檢測(cè)M2-型丙酮酸激酶(PKM2)，經(jīng)檢測(cè)與其它相似物質(zhì)無(wú)明顯交叉反應(yīng)。
由于受到技術(shù)及樣本來(lái)源的限制，不可能完成對(duì)所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測(cè)，因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測(cè)的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的M2-型丙酮酸激酶(PKM2)（加標(biāo)樣品），重復(fù)測(cè)定并計(jì)算其均值，回收率為測(cè)定值與理論值的比率。

樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 88-99 95
EDTA plasma(n=5) 90-97 94
heparin plasma(n=5) 81-96 85

精密度

精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差：取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20 次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差：選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測(cè)定，每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差： CV<10%
批間差： CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的M2-型丙酮酸激酶(PKM2)，并倍比稀釋成1:2，1:4，1:8，1:16的待測(cè)樣本，線性范圍即為稀釋后樣本中M2-型丙酮酸激酶(PKM2)含量的測(cè)定值與理論值的比率。

樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 88-102% 80-104% 85-104% 88-96%
EDTA plasma(n=5) 89-101% 99-105% 90-104% 91-101%
heparin plasma(n=5) 78-97% 85-104% 99-105% 89-104%

穩(wěn)定性

經(jīng)測(cè)定，試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響，實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來(lái)進(jìn)行操作可減少人為誤差。

實(shí)驗(yàn)流程

1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100µL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測(cè)溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。

實(shí)驗(yàn)原理

將M2-型丙酮酸激酶(PKM2)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的M2-型丙酮酸激酶(PKM2)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入生物素化的M2-型丙酮酸激酶(PKM2)抗體，將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記的親和素，再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的M2-型丙酮酸激酶(PKM2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值)，計(jì)算樣品濃度。

相關(guān)產(chǎn)品

編號(hào) 適用物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠) 應(yīng)用(僅供研究使用，不用于臨床診斷！)
RPA588Ra01 M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白 Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
PAA588Ra01 M2-型丙酮酸激酶(PKM2)多克隆抗體 WB; IHC; ICC; IP.
FAA588Ra01 抗M2-型丙酮酸激酶(PKM2)多克隆抗體 Flow cytometry.
MAA588Ra21 M2-型丙酮酸激酶(PKM2)單克隆抗體 WB; IHC; ICC; IP.
SEA588Ra M2-型丙酮酸激酶(PKM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) Enzyme-linked immunosorbent assay for Antigen Detection.
LMA588Ra M2-型丙酮酸激酶(PKM2)等多因子檢測(cè)試劑盒(流式熒光發(fā)光法) FLIA Kit for Antigen Detection.

參考文獻(xiàn)

雜志 參考文獻(xiàn)
Cancer Research Antigen Presentation by Dendritic Cells in Tumors Is Disrupted by Altered Metabolism that Involves Pyruvate Kinase M2 and Its Interaction with SOCS3 [AACR: 70189]
Molecular BioSystems Abnormal levels of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2B1 (hnRNPA2B1) in tumour tissue and blood samples from patients diagnosed with lung cancer [Pubmed:25483567]
Tumour Biol M2 isoform of pyruvate kinase (PKM2) is upregulated in Kazakh’s ESCC and promotes proliferation and migration of ESCC cells [PubMed: 26404132]
Oncotarget Identification of a serum biomarker panel for the differential diagnosis of cholangiocarcinoma and primary sclerosing cholangitis [Pubmed:29707118]
Journal of?Neurotrauma Acteoside improves muscle atrophy and motor function by inducing new myokine secretion in chronic spinal cord injury [Pubmed: 30318996]
Cell Reports Secreted Pyruvate Kinase M2 Promotes Lung Cancer Metastasis through Activating the Integrin Beta1/FAK Signaling Pathway [Pubmed: 32049010]
Chrysin serves as a novel inhibitor of DGKα/FAK interaction to suppress the malignancy of esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) []
Cancer Cell International Bufalin Induced Mitochondrial Dysfunction Promotes Apoptosis of Glioma Cells by Regulating Annexin A2 and DRP1 Proteins []
Cancer Cell Int Bufalin induces mitochondrial dysfunction and promotes apoptosis of glioma cells by regulating Annexin A2 and DRP1 protein expression [34376212]
Life (Basel) Putative Association between Low Baseline Gene Expression in the Peripheral Blood and Clinical Remission in Rheumatoid Arthritis Patients Treated with Tofacitinib [34947916]
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