記憶障礙小鼠模型

Mouse Model for Dysmnesia

Allomnesia; Memory impairment; Memory disorder

• 大腦和神經(jīng)系統(tǒng)
• SPF

• 編號DSI706Mu01
• 物種Mus musculus (Mouse，小鼠) 相同的名稱，不同的物種。
• • 所有
  • 人
  • 小鼠
  • 大鼠
  • 豚鼠
  • 家兔
  • 獼猴
  • 山羊
  • 綿羊
  • 馬
  • 牛
  • 豬
  • 雞
  • 狗
  • 其他物種
  • 多物種
  • 泛物種
• 原型物種人
• 來源藥物導(dǎo)致記憶障礙
• 模式動物品系SPF級 KM小鼠，健康，雄性，4~6W，體重為30g左右。
• 實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)分六組：正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個(gè)劑量組。
• 實(shí)驗(yàn)周期2-3 weeks
• 建模方法記憶獲得障礙模型制造：訓(xùn)練前10min 腹腔注射樟柳堿或東莨菪堿5mg/kg BW；
  記憶鞏固障礙模型制造：訓(xùn)練前10min 腹腔注射環(huán)已酰亞胺120mg/kg BW；
  記憶再現(xiàn)障礙模型制造：重測驗(yàn)前30min 灌胃30％ 的乙醇10mL/kg BW。
  
  一、被動行為試驗(yàn)--避暗實(shí)驗(yàn)
  原理：
  利用小鼠嗜暗的習(xí)性設(shè)計(jì)一個(gè)裝置，一半是暗室，一半是明室，中間有一小洞相連。暗室底部鋪有通電的銅柵，并與一計(jì)時(shí)器相連，計(jì)時(shí)器可自動記錄潛伏期的時(shí)間。小鼠進(jìn)入暗室即受到電擊，計(jì)時(shí)自動停止。
  儀器和試劑：
  避暗儀：該裝置分明暗兩室。暗室較大，兩室之間有一直徑約3cm的圓洞。兩室底部均鋪以銅柵。暗室底部中間位置的銅柵可以通電，電擊強(qiáng)度可在一旋鈕上任意選擇。一般采用40v電壓（或0.3-0.4mA電流）底部中間位置的銅柵可以通電，電擊強(qiáng)度可在一旋鈕上任意選擇。采用附帶隔音箱和視頻分析系統(tǒng)的儀器。
  實(shí)驗(yàn)步驟：
  受試樣品對正常小鼠記憶的影響
  末次給樣后次日（或一次給樣后1h）開始訓(xùn)練。實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠面部背向洞口放入明室，同時(shí)啟動計(jì)時(shí)器。動物穿過洞口進(jìn)入暗室受到電擊，計(jì)時(shí)器自動停止，取出小鼠，記錄每鼠從放入明室至進(jìn)入暗室遭電擊所需的時(shí)間，此即潛伏期，訓(xùn)練5min，并記錄5min內(nèi)電擊次數(shù)。24h或48h后重作測驗(yàn)，記錄每只動物進(jìn)入暗室的潛伏期和5min內(nèi)的電擊次數(shù)，并計(jì)算5min 內(nèi)進(jìn)入暗室（錯(cuò)誤反應(yīng)）的動物百分率。以上實(shí)驗(yàn)步驟為記憶獲得過程。停止訓(xùn)練5天后可以在不同的時(shí)間進(jìn)行一次或多次記憶消退實(shí)驗(yàn)（即記憶再現(xiàn)過程）。
  二、主動行為試驗(yàn)--Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)
  原理：
  實(shí)驗(yàn)動物被強(qiáng)迫在水箱內(nèi)游泳，觀察并記錄動物尋找到隱藏在水下平臺所需的時(shí)間、游泳軌跡及其采用的策略，分析和推斷動物的學(xué)習(xí)、記憶和空間定位等方面的能力。
  儀器與試劑：
  Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)由圓形水池、圖像自動采集和處理系統(tǒng)組成。圖像自動采集和處理系統(tǒng)主要由攝像機(jī)、計(jì)算機(jī)、圖像監(jiān)視器組成，動物入水后啟動監(jiān)測裝置，記錄動物運(yùn)動軌跡，實(shí)驗(yàn)完畢自動分析報(bào)告相關(guān)參數(shù)。
  Morris水迷宮圓形水池為一圓柱形水桶，直徑為120cm（小鼠），高為50-60cm，水池水深為30-40cm，一個(gè)圓形平臺直徑約為9cm（小鼠），藏匿于1cm的水面之下。水池的內(nèi)部不得有任何標(biāo)記，在圓桶的上緣等距離地設(shè)東、南、西和北4個(gè)標(biāo)記點(diǎn)，作為動物進(jìn)水池的入水點(diǎn)，以這4個(gè)入水點(diǎn)在水面和水桶底部的投影點(diǎn)作為參照位點(diǎn)，將水面和水桶部分均等的分為4個(gè)象限，按實(shí)驗(yàn)要求，可任意地將平臺設(shè)置于某一象限的中間。適當(dāng)?shù)暮銣卦O(shè)備使水溫保持在23～25℃。水迷宮水池應(yīng)配有良好的注水和排水設(shè)備，水池的位置一旦確定，就不要輕易變動，尤其在同一輪水迷宮的測試中。
  水迷宮圖像自動采集和處理系統(tǒng)：自動地采集動物的入水位置、游泳的速度、搜索目標(biāo)的所需時(shí)間和運(yùn)行軌跡等參數(shù)，并可對所采集的各種數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。
  實(shí)驗(yàn)步驟：
  連續(xù)給予受試物后，實(shí)驗(yàn)前一天,大鼠自由游泳2min以熟悉環(huán)境，其間引導(dǎo)動物站上平臺10s。次日開始訓(xùn)練，訓(xùn)練期間繼續(xù)給樣。
  定位航行試驗(yàn)：用于測量實(shí)驗(yàn)動物對水迷宮學(xué)習(xí)和記憶獲得的能力。訓(xùn)練天數(shù)依據(jù)動物的學(xué)習(xí)能力確定，每完成4個(gè)象限的訓(xùn)練當(dāng)做1個(gè)循環(huán)，動物每次從1個(gè)象限的入水點(diǎn)入水，將動物面向池壁放入水中，儀器自動記錄動物尋找并爬上平臺的路線圖、動物從入水到找到水下隱蔽平臺并站立其上所需時(shí)間(逃避潛伏期)及游泳總路程。如果動物在90s內(nèi)未找到平臺，則需將其引至平臺，這時(shí)潛伏期以90s計(jì)，讓動物在平臺停留10s后，再放回籠中。如此重復(fù)完成4個(gè)象限的試驗(yàn)，象限選擇和各實(shí)驗(yàn)組動物訓(xùn)練順序應(yīng)隨機(jī)確定或交叉進(jìn)行。直至80-90%以上的動物在規(guī)定時(shí)間內(nèi)找到平臺或至少完成3個(gè)循環(huán)的試驗(yàn)，可終止試驗(yàn)。
  空間探索試驗(yàn)：定位航行試驗(yàn)結(jié)束5天后，將水下平臺撤除，按照定位航行試驗(yàn)的方法重復(fù)1個(gè)循環(huán)（共4個(gè)象限）的試驗(yàn)，動物每次從1個(gè)象限的入水點(diǎn)入水，記錄90s內(nèi)小鼠在水池4個(gè)象限中的游泳距離、路徑、時(shí)間，據(jù)此推算平臺所在象限數(shù)據(jù)占總距離、總時(shí)間的百分比及穿越平臺的次數(shù)，用來反映大鼠對平臺所在位置的空間記憶能力，以判斷動物記憶儲存及提取再現(xiàn)能力。
• 應(yīng)用用于記憶獲得障礙、記憶鞏固障礙和記憶再現(xiàn)障礙模型
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