肝缺血(HI)小鼠模型
Mouse Model for Hepatic Ischemia (HI)
Hepatic ischemia/reperfusion; Liver ischemia
- 編號DSI527Mu01
- 物種Mus musculus (Mouse,小鼠) 相同的名稱,不同的物種。
- 原型物種Human
- 來源缺血再灌注肝損傷
- 模式動物品系SPF級Balb/c小鼠,雄性,周齡為6w~8w,體重為20g-25g。
- 實驗分組實驗分六組:正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。
- 實驗周期4-6 weeks
- 建模方法1 小鼠術(shù)前12 h禁食,自由飲水。
2 3%戊巴比妥鈉80mg/kg腹腔注射麻醉,麻醉成功后將小鼠平躺在手術(shù)臺上膠帶固定四肢,將小鼠腹部術(shù)去毛,用碘酒和75%乙醇術(shù)區(qū)消毒。
3 取腹正中切口1cm,打開腹腔,小心分離出肝臟供血的門靜脈和肝動脈。
4 用無創(chuàng)血管夾夾閉門靜脈和肝動脈,0.5min后,肉眼可見阻斷葉明顯變白,說明阻斷成功,用止血鉗夾閉皮膚切口臨時關(guān)閉腹腔,同時將小鼠放在37℃恒溫加熱墊上保溫。
5 完成持續(xù)缺血60min后,重新打開腹腔,迅速取出血管夾,恢復(fù)缺血肝血流,0.5min左右可見缺血區(qū)肝臟由白色逐漸恢復(fù)為鮮紅色表明再灌注成功,逐層縫合腹腔肌肉和皮膚關(guān)閉腹腔,完成手術(shù)。待小鼠清醒后放回飼養(yǎng)室飼養(yǎng),密切關(guān)注小鼠的狀態(tài)及生存狀況并做好記錄。
4.注意事項
1 分離肝門時用棉簽分離,可避免對肝臟的損傷
2術(shù)前禁食有利于手術(shù)進(jìn)行
3阻斷血流要一次成功,否則會造成缺血預(yù)處理,減輕損傷程度
4取材時鑷子不要損傷肝臟 - 應(yīng)用用于研究肝部損傷模型
- 下載 英文說明書 中文說明書
- 規(guī)格 每例
- 價格 ¥ 1200
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模型評價
模型評價
肝臟缺血損傷評分:
0分:無肝細(xì)胞損傷
1分:輕度損傷,特點為細(xì)胞質(zhì)空泡化,病灶核固縮
2分:中度損傷,血竇膨脹,細(xì)胞溶質(zhì)空泡化,細(xì)胞邊界模糊
3分:中度到重度損傷,凝固性壞死,大量血竇膨脹,紅細(xì)胞滲出到肝鎖,嗜伊紅細(xì)胞增多,中性白細(xì)胞著邊(附著于血管壁)
4分:嚴(yán)重壞死,失去肝臟結(jié)構(gòu),肝索崩解,出血,嗜中性粒細(xì)胞滲入
組織病理學(xué)
組織病理學(xué)
取肝左葉組織1.5cm×1cm×0.2cm于4%多聚甲醛溶液中固定24h后脫水,包埋,進(jìn)行石蠟切片后行HE染色,tunel染色。作壞死評分。肝小葉結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞,網(wǎng)狀纖維支架塌陷,肝細(xì)胞壞死,空泡變樣,肝細(xì)胞索、肝竇充血腫脹,邊界不清,周圍有炎性細(xì)胞浸潤。
標(biāo)志因子水平
生化指標(biāo)檢測:分別檢測術(shù)后0h、3h、6h、12h、24h及72h小鼠鼠血清中ALT(谷丙轉(zhuǎn)氨酶)、AST(天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)的水平,γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶(GGT),總膽紅素(T-Bil),直接膽紅素(D-Bil),間接膽紅素(I-Bil),總膽汁酸(TBA)?。
流式檢測:
1. 樣本前處理
①剪碎:將消化液中的組織充分剪碎
②加入消化液:每個肝組織加入5ml消化液
③消化:37℃消化 45min
④ 中止:消化完的組織加入終濃度為10%FBS的1640 10ml,終止酶反應(yīng)。
⑤過濾:將組織懸液經(jīng)200目濾網(wǎng)過濾
⑥洗滌:收集單細(xì)胞懸液至于50ml EP管中,2000rpm 離心10min。
⑦疊層:用小鼠淋巴細(xì)胞分離液疊層處理
⑧ 收細(xì)胞:吸取位于中間的透明細(xì)胞層,F(xiàn)ACs buffer 離心洗滌細(xì)胞一次。
2. 流式染色:
①FcR封閉:加入1% FcR 阻斷劑(anti CD16/32 antibody),每樣本100ul。4℃ 孵育30min,F(xiàn)ACs buffer 離心洗滌。
②樣本表面抗體工作液:
配置混合抗體工作液,每樣本100ul;
加入抗體工作液后,4℃ 孵育避光30min,F(xiàn)ACs buffer 離心洗滌。
PerCP anti-mouse CD11b
PE/Cy7 anti-mouse Ly-6G
FITC anti-mouse CD45
PE anti-mouse F4/80
3.樣本胞內(nèi)染色:
加入固定破膜液50ul,用槍頭輕柔吹打重懸,室溫避光45min。完成后,加入1x perm/wash buffer洗滌。
4.染色完成,重懸細(xì)胞:
樣本染色完成(每樣本使用200ul FACs buffer重懸),4℃ 避光保存,待上機。
5.流式上機:
上機樣本,收集總數(shù)目50萬/細(xì)胞。
統(tǒng)計學(xué)分析
應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析,計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯
增值服務(wù)
組織/切片定制服務(wù)
血清定制服務(wù)
免疫組織化學(xué)(IHC)實驗服務(wù)
小動物體內(nèi)成像實驗服務(wù)
小動物微型CT成像實驗服務(wù)
小動物核磁共振(MRI)成像實驗服務(wù)
小動物超聲成像實驗服務(wù)
透射電鏡(TEM)實驗服務(wù)
掃描電鏡(SEM)實驗服務(wù)
學(xué)習(xí)與記憶行為學(xué)實驗服務(wù)
焦慮與抑郁行為學(xué)實驗服務(wù)
藥物成癮行為學(xué)實驗服務(wù)
疼痛行為學(xué)實驗服務(wù)
神經(jīng)精神異常行為學(xué)實驗服務(wù)
疲勞行為學(xué)實驗服務(wù)
一氧化氮測定試劑盒 (A012)
一氧化氮測定試劑盒 (A013-2)
總抗氧化能力檢測試劑盒A015-2)
總抗氧化能力檢測試劑盒(A015-1)
超氧化物歧化酶試劑盒
果糖檢測試劑盒
檸檬酸檢測試劑盒
過氧化氫酶檢測試劑盒
丙二醛檢測試劑盒
谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶試劑盒
還原型谷胱甘肽測定試劑盒
谷胱甘肽還原酶活性系數(shù)測定試劑盒
血管緊張素轉(zhuǎn)換酶測定試劑盒
谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)試劑盒
流式熒光發(fā)光法檢測試劑盒定制服務(wù)
云克隆多因子檢測試劑盒
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編號 | 適用物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) | 應(yīng)用(僅供研究使用,不用于臨床診斷!) |
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