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急性脊髓損傷(ASCI)大鼠模型

Rat Model for Actue Spinal Cord Injury (ASCI)

Traumatic Spinal Cord Injury

  • 編號(hào)DSI545Ra01
  • 物種Rattus norvegicus (Rat，大鼠) 相同的名稱，不同的物種。
  • 原型物種人
  • 來源Allen’s法導(dǎo)致脊髓損傷
  • 模式動(dòng)物品系SPF級(jí)Wistar大鼠，健康，雄性，體重為180g~200g
  • 實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)分六組：正常對(duì)照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個(gè)劑量組，每組15只動(dòng)物。
  • 實(shí)驗(yàn)周期4w
  • 建模方法1.取正常大鼠用水合氯醛作腹腔麻醉(350mg/kg)，將大鼠俯臥，固定于大鼠固定板上，在背部脊髓兩側(cè)觸摸大鼠最下肋與軟組織分界處(浮肋與第 13胸椎連接處)作為骨定位標(biāo)志，向上、下5 cm 范圍備皮、脫毛后常規(guī)消毒，鋪無菌手術(shù)單，在后正中線做縱行切口，大約 3cm，依次切開皮膚、皮下筋膜，暴露椎旁肌，約平對(duì)第 10 胸椎棘突，鈍性剝離肌肉暴露棘突、椎板和橫突。參考定位：T9棘突傾向尾側(cè)，T10 棘突中立位，T11 棘突傾向頭側(cè)。
    2.確定 T10胸椎位置，用骨剪在 T9 與 T10、T10與T11 棘突及相應(yīng)椎板之間分別做兩個(gè)橫行剪口，再在 T10 胸椎兩側(cè)，橫突與椎板連接處做縱行剪口，形成一個(gè)方形剪口界線，然后用咬骨鉗咬住 T10 胸椎棘突用力拉起即“揭蓋”，去除 T10 椎板，形成方形骨窗，修整骨窗邊緣，充分暴露 T10對(duì)應(yīng)的脊髓。
    3. 用Allen' s 撞擊器制備脊髓損傷動(dòng)物模型，打擊時(shí)，用拉鉤拉開脊髓兩側(cè)軟組織，牽拉固定，使脊柱穩(wěn)定，不受呼吸運(yùn)動(dòng)影響，使 20 g 重量的擊打棍從 3 cm 高度自由落體，致傷能量 60 g·cm，撞擊T10 骨窗對(duì)應(yīng)的脊髓，造成急性脊髓損傷，擊打脊髓后，擊打棍不動(dòng)，停留 3 min 再移開。
    4. 撞擊成功標(biāo)準(zhǔn)為：撞擊脊髓組織水腫、出血，硬脊膜完整呈紫紅色，緊張，膨隆，大鼠尾巴出現(xiàn)痙攣性擺動(dòng)，雙下肢軀體回縮樣撲動(dòng)，呈遲緩性癱瘓。常規(guī)分層縫合后回籠飼養(yǎng)。
    5. 術(shù)后4W，水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠后，將大鼠固定于固定板上，暴露脊髓 T8～ T12，迅速取出脊髓組織，4%多聚甲醛后固定 4 h，石蠟包埋切片(厚4um)，HE染色，觀察病理改變。
  • 應(yīng)用疾病模型
  • 下載 英文說明書   中文說明書
  • 規(guī)格 每例
  • 價(jià)格 ¥ 1440
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  • 急性脊髓損傷(ASCI)大鼠模型 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • 急性脊髓損傷(ASCI)大鼠模型 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • 急性脊髓損傷(ASCI)大鼠模型 Fig 1. Allen 's impactor hits the spinal cord
  • 急性脊髓損傷(ASCI)大鼠模型 Fig. Neurological Tracing of BDA in Rat Spinal Cord
  • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證

模型評(píng)價(jià)

1. 術(shù)后一般情況觀察 ：各損傷組大鼠的術(shù)后基本情況基本一致，打擊后大鼠均表現(xiàn)為身體痙攣性顫動(dòng)，尾巴痙攣性擺動(dòng)，雙下肢及軀體回縮樣撲動(dòng)。麻醉蘇醒后大鼠雙下肢呈弛緩性癱瘓，可出現(xiàn)尿潴留或尿失禁。解剖可見傷后大鼠硬脊膜內(nèi)充血或水腫。
2.做BBB評(píng)分：0分：無可見后肢運(yùn)動(dòng)，1分：一或兩個(gè)關(guān)節(jié)輕微運(yùn)動(dòng)，通常為髖和/或膝關(guān)節(jié)，都可認(rèn)為造模成功；
3.斜板實(shí)驗(yàn)：將大鼠身體垂直于斜板的縱軸放置，斜板由自制的表面粗糙的木板制成，大鼠利用前肢和后肢的力量保持身體停留自斜板上。斜板每次升高或降低5度，以保證大鼠能停留在斜板上5秒，以能停留5秒的最大角度為其功能值。
4.BDA示蹤術(shù)：術(shù)后5W，將大鼠麻醉后固定在腦立體定位儀上，縱行切開顱頂區(qū)頭皮，剪開骨膜并推向四周，雙氧水棉簽擦拭顱骨，參考大鼠腦離體定位圖譜，以前囟為原點(diǎn)，共選擇 8 個(gè)位置鉆孔，微量進(jìn)樣器將5% BDA 溶液1μL注射入大鼠腦運(yùn)動(dòng)皮質(zhì)區(qū)，進(jìn)針深度自顱骨表面起始約3.5mm，微量注射泵設(shè)置注射時(shí)間為5min，（留針5min）注射完畢后縫合頭皮。2w后取損傷節(jié)段以下脊髓組織標(biāo)本進(jìn)行BDA 熒光染色，觀察皮質(zhì)脊髓束神經(jīng)纖維。
5.大鼠坐骨神經(jīng)熒光金逆行追蹤：各組隨機(jī)取大鼠，麻醉后沿股外側(cè)肌間隙顯露坐骨神經(jīng)，通過組織鉗鉗夾挫傷坐骨神經(jīng)，在避光條件下使用微量注射器在坐骨神經(jīng)挫傷區(qū)多點(diǎn)注射2%熒光金，每側(cè)坐骨神經(jīng)注射0.4ul，注射速度為0.1ul/min。每注射位點(diǎn)留針5min，切口內(nèi)撒8*104U的青霉素粉劑，逐層縫合切口，造模后正常飼養(yǎng)。1周后予脊髓損傷處取材進(jìn)行組織學(xué)檢查。進(jìn)行冰凍切片，20um切片，每組每只動(dòng)物5張切片，熒光顯微鏡下觀察熒光金標(biāo)記細(xì)胞的分布情況。

組織病理學(xué)

HE 染色可以觀察到假手術(shù)組灰、白質(zhì)組織結(jié)構(gòu)基本完整,神經(jīng)細(xì)胞在灰質(zhì)中分布均勻、胞體飽滿、形態(tài)正常、細(xì)胞膜完整，白質(zhì)內(nèi)神經(jīng)纖維排列整齊, 細(xì)胞間質(zhì)均勻。SCI 組可見灰、白質(zhì)組織結(jié)構(gòu)不完整，損傷區(qū)灰質(zhì)可見大片出血、大片壞死灶 、細(xì)胞腫脹、有的出現(xiàn)囊腔，白質(zhì)內(nèi)神經(jīng)纖維排列不規(guī)則。

標(biāo)志因子水平

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x ±ｓ）表示，采用ｔ檢驗(yàn)，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05表示有顯

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